培养基中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡，除此以外钙离子在细胞外液中的作用是将组织内部细胞之间相互粘着，在细胞内也参与许多重要的细胞生理活动；而镁离子是构成细胞间质的重要成分，对于细胞间相互稳定结合有很重要的意义。

因此，为了探究影响细胞贴壁性的重要因素，增强无血清培养时细胞的贴壁性和增殖速率，我们通过调节培养基中钙镁离子的比例、浓度来优化细胞培养效果。

方法：根据培养基中不同钙镁离子比例进行分组实验，对比不同比例钙镁离子对细胞贴壁状态、增殖速率等方面的影响。

结论：Vero细胞无血清培养过程中不同配比的钙镁离子对细胞生长有较大影响，天信和优化出了更适合Vero细胞在普通材质培养瓶中无血清培养的培养基。

关键词：Vero细胞；无血清；钙镁离子；贴壁生长

随着对疫苗质量和安全性要求的不断提高，用无血清培养基取代含血清培养基培养Vero细胞已成为病毒疫苗生产的一个重要发展趋势。Vero细胞无血清培养的技术关键是研发或选择能支持细胞以贴附培养方式生长的无血清培养基。

中生天信和生物专注无血清培养基开发，通过实验研究表明，在Vero细胞无血清培养中，钙镁离子对细胞的贴壁与增殖有着至关重要的影响。适当的钙镁离子比例可有效改善细胞贴壁形态及增殖速率。

实验方法：用含不同比例钙镁离子的无血清培养基，无血清培养Vero细胞，控制相同的接种密度、培养时间、培养环境等，观察细胞贴壁状态、增殖速率等。

培养基共分成5组：（cellbind方瓶）

①Ca2+/Mg2+=3:1

②Ca2+ /Mg2+=3:1

③Ca2+ /Mg2+=2:1

④Ca2+ /Mg2+=1:2

⑤Ca2+ /Mg2+=1:3

接种密度：7*106cells/T75

培养基：30ml

培养条件：37℃ 5%CO2

培养时间：72h

消化计数传代（12ml培养基重悬细胞后计数）

实验数据：

Day3 组①

Day3 组②

Day3 组③

Day3 组④

Day3 组⑤

分析总结

通过对比组①组②实验数据：相同条件下，在cellbind方瓶中培养的细胞，形态和增殖速度都优于普通方瓶；

通过对比组②组③组④组⑤实验数据：在普通方瓶中，组④培养的细胞形态和增殖速度较优，而且增殖速度还优于cellbind方瓶中培养的组①；

综上所述：调整培养基中钙镁离子含量配比，对细胞的生长、贴壁有较大影响。天信和生物技术有限公司通过调整钙镁离子配比，优化出了更适合无血清培养Vero细胞的培养基，优化后的无血清培养基不仅可以在cellbind处理材质的培养瓶中良好生长，也支持细胞在普通材质培养瓶中稳定生长。

关于 天信和生物

       北京天信和生物科技有限公司，成立于2014年1月，于2015年8月成立全资子公司天信和(苏州）生物科技有限公司，2020 年3月，成为国药集团中国生物技术股份有限公司旗下控股子公司。

       公司作为生物制药产业支撑技术服务商和供应商，致力于个性化细胞培养基研究和生产、生物反应器工艺化设计及制造、动物细胞大规模培养工艺技术研究、 生物过程工艺技术开发及转让，以此为基础构建了生物制药过程技术工艺开发平台。